Klinik örneklerden izole edilen Staphylococcus aureus suşlarının metisilin dirençlilik genlerinin belirlenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2012

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ELİF BAYTAROĞLU

Danışman: Zehranur Yüksekdağ

Özet:

Metisilin dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) hem toplum hem de hastane kökenli enfeksiyonlardan izole edilen önemli bir patojendir. Antibiyotiklerin uzun süreli kullanımı ile birlikte, bu bakteri, farklı direnç mekanizmaları geliştirmiştir. Tedavisi ise oldukça güç ve maliyetlidir. S. aureus suşlarında metisilin direncinin doğru ve hızlı bir şekilde belirlenmesi, enfeksiyon kontrol önlemlerinde ve hastanede yayılımının önlenmesi açısından anahtar rol oynamaktadır. Çalışmanın amacı, klinik örneklerden izole edilen S. aureus suşlarının metisilin dirençlilik genlerinin belirlenmesidir. Bu çalışmada, Gazi Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesinde tedavi olan hastalara ait çeşitli klinik örneklerden soyutlanan 48 Staphylococcus aureus suşu incelenmiştir. Suşların tanımlanması standart mikrobiyolojik yöntemler (koloni morfolojisi, Gram boyama, kanlı agarda hemoliz, DNaz, katalaz, koagülaz testleri ve mannitol fermentasyonu) kullanılarak gerçekleştirilmiş; metisilin direnci, ?Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü (CLSI)? önerileri doğrultusunda Kirby-Bauer disk difüzyon yöntemi ile belirlenmiştir. Bu suşlardan 39 tanesi metisiline duyarlı olmasına rağmen 9 tanesi (EB3, EB4, EB6, EB17, EB18, EB33, EB36, EB46, EB47) metisiline dirençli bulunmuştur. Stafilokoklarda heterojen dirençli suşlar nedeniyle metisilin direncinin fenotipik yöntemlerle gösterilmesi sıklıkla yanlışlıklara neden olduğundan, Staphylococcus aureus izolatlarında metisilin direncinin gösterilmesinde en uygun yöntem polimeraz zincir reaksiyonu ile mecA geninin belirlenmesidir. Bu amaçla, disk difüzyon yöntemi ile metisiline dirençli olduğu belirlenen 9 Staphylococcus aureus suşlarından ve metisiline duyarlı 3 suşdan (EB5, EB9, EB12) kaynatma yöntemiyle DNA ekstraksiyonu yapılmış, polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) yöntemiyle mecA geni araştırılmıştır. Disk difüzyon yöntemi ile duyarlı çıkan EB12 suşunun metisilin direnç geni içerdiği tespit edilmiştir. Bu çalışma metisilin direncinin tespitinde disk difüzyon tekniğinin moleküler yöntemlerle desteklenmesi gerektiğini göstermektedir.