Pichia kudriavzevii JD2 Maya Suşunun Bazı Probiyotik Özelliklerinin ve Suştan İzole Edilen Ekzopolisakkaritin Prebiyotik Aktivitelerinin Belirlenmesi


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Fakültesi, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2023

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Jaafar Nozad Aakef AAKEF

Danışman: Zehranur Yüksekdağ

Özet:

Bu çalışmada, hurmadan izole edilen Pichia kudriavzevii JD2 suşunun bazı probiyotik özellikleri ve suştan elde edilen ekzopolisakkaritin (EPSJD2), hücresiz süpernatantın (postbiyotik-CFSJD2), sinbiyotik (JD2+EPSJD2), postbiyotik+prebiyotik (CFSJD2+EPSJD2) uygulamanın bazı biyolojik aktiviteleri araştırılmıştır. JD2 ve prebiyotik ilaveli ortamda geliştirilen JD2’nin farklı konsantrasyonlarda safra içeren ortamlarda kolesterolü giderimi sırasıyla, %62 ve %65 ve presipitasyonu sırasıyla 38,2 ve 41,2 μg/mL olarak belirlenmiştir. JD2, yapay bağırsak sıvısında 0. dakikada ve %0,06 safra konsantrasyonunda en yüksek canlılık (5,95 log cfu/mL) gösterirken, 1. ve 240. dakikada canlı hücre sayısında azalma olduğu gözlenmiştir. Suşun, 60 ve 180 dakika sonra pH 3’te yapay mide sıvısında canlı hücre sayısı sırasıyla 5,48 ve 4,98 log kob/mL olarak tespit edilmiştir. Suş, hekzon solventinde %85, toluende %79 ve asetonda %73 hidrofobisite göstermiştir. EPSJD2’nin toplam karbonhidrat miktarı 246 mg/L, molekül ağırlığı 42,309 kDa olarak belirlenmiştir. Çalışmada EPSJD2’nin prebiyotik aktivite skorları Lactiplantibacillus plantarum subsp. plantarum DSM20246 (48 saatte 2,44 log cfu/mL) ve S. cerevisiae BU19’a (48 saatte 1,17 log kob/mL) kullanılarak tespit edilmiştir. EPSJD2 mide sıvısında (pH 3) %4,88 hidroliz olmuştur. CFSJD2’nin metabolik içeriklerinin farklı türde amino ve yağ asitleri, fenoller, vitaminler ve şekerler olduğu bulunmuştur. L. plantarum subsp. plantarum DSM20246 ve S. cerevisiae BU19’un prebiyotiği (EPSJD2) fermente etme kapasitesi sırasıyla 6,4 ve 7,6 log kob/mL olarak belirlenmiştir. Çalışmada, JD2, CFSJD2, farklı konsantrasyonlarda (0,5, 1, 5, 10 mg/mL) EPSJD2, JD2+EPSJD2 ve CFSJD2+EPSJD2 uygulamalarının antioksidan aktiviteleri üç farklı metot (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH), süperoksit anyon ve hidroksil radikalini süpürücü aktivitesi) ile tespit edilmiştir. Sonuçlar genel olarak değerlendirildiğinde, en yüksek antioksidan aktivite DPPH metodunda 10 mg/mL’lik CFSJD2+EPSJD2 uygulamasında %86,6, en düşük aktivite ise süperoksit anyon radikali süpürücü aktivitesi metodunda 0,5 mg/mL’lik EPSJD2’de %44,2 olarak bulunmuştur. Üç metotta da araştırmada incelenen tüm uygulamaların bitkisel kaynaklı ticari prebiyotik olan inülinin antioksidan aktivitelerinden yüksek olduğu belirlenmiştir (p<0,05). Staphylococcus aureus ATCC 25923, Pseudomonas aeroginosa 29212 ve Escherichia coli ATCC 11229 suşlarına karşı antibiyofilm aktivite JD2’de CFSJD2’ye daha fazla bulunurken prebiyotik konsantrasyonu arttıkça prebiyotik, sinbiyotik ve postbiyotik+prebiyotik uygulamanın anti-biyofilm aktivitesi artmıştır. Elde edilen sonuçlar doğrultusunda JD2 suşundan elde edilen ekzopolisakkaritin prebiyotik olarak kullanılma potansiyeline sahip olduğu düşünülmektedir.

Anahtar Kelimeler : Pichia kudriavzevii, probiyotik, prebiyotik, ekzopolisakkarit