Probiyotik Pichia kudriavzevii M16 maya hücre duvarındaki beta-glukanın parabiyotik olarak değerlendirilmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2022

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Belgin GÜLDESTE

Danışman: Zehranur Yüksekdağ

Özet:

Maya hücre duvarının önemli bir bileşeni olan beta glukan (β-glu), D-glukoz monomerlerinin beta glukozidik bağlarla birbirine bağlı olduğu doğal bir polisakkarittir. β- glukan içeriği açısından mayalar diğer kaynaklara göre daha zengin olduğundan ticari üretimde tercih edilmektedirler. Bu tez çalışmasında, probiyotik Pichia kudriavzevii M16 maya suşunun hücre duvarından β-glukan biyopolimeri (β-gluM16) ekstrakte edilerek kimyasal bir modifikasyonla (karboksimetilasyon-CM) suda çözünürlüğü artırılmış ve ardından karakterizasyonu (moleküler ağırlığı ve fonksiyonel grupları) ve bazı biyoaktiviteleri (antioksidan, antimikrobiyal, antibiyofilm, adezyon yeteneği, sitotoksisite, sitokin seviyeleri) incelenmiştir. Elde edilen CMβ-gluM16 biyopolimerinin antioksidan aktivitesi DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) radikal süpürücü aktivite, hidroksil radikali süpürücü aktivitesi ve süperoksit anyonu süpürücü aktivitesi yöntemleriyle belirlenmiştir. DPPH radikal süpürücü aktivite metodu sonucu biyopolimerin farklı derişimlerde (0,2-100 mg/mL) uygulanması ile %75-96; süperoksit anyonu süpürücü aktivite metodu sonucu %45- 76; hidroksil radikali süpürücü aktivite sonucunda ise %51-70 antioksidan aktivite belirlenmiştir. CMβ-gluM16’nın antibiyofilm aktivitesi farklı test bakterilerine karşı farklı dozlarda (0,2-0,5-1-5-10-20-30-100) %57-80 oranında tespit edilmiştir. CMβ-gluM16’nın MTT testi ile sitotoksisitesi iki farklı hücre hattında incelenmiş ve HT-29 insan kolorektal adenokarsinom hücre hattında anti-proliferatif etki bulunurken, L929 sağlıklı fibroblast hücrelerinde dikkate değer bir toksisite bulunmamıştır (p>0,05). CMβ-gluM16’nın antimikrobiyal aktivitesine rastlanmamıştır. Lactobacillus plantarum LP1 probiyotik bakterisi ve farklı dozlarda (50-200-500 µg/mL) CMβ-gluM16 sinbiyotiği kullanılarak çeşitli kombinasyonlarda adezyon deneyi yapılmış ve CMβ-gluM16’nın probiyotiğin bağırsak epitel hücrelerine adezyon yeteneğini arttırdığı belirlenmiştir. CMβ-gluM16’nın IL-1β, IL-6, IL-10 ve TNFα ELISA kitleri ile sitokin seviyeleri belirlenmiş olup doza ve uygulama saatine bağlı olarak IL-1β, IL-6, TNF-α salınımını azalttığı, IL-6 salınımını ise aynı şekilde doza ve uygulama saatine bağlı olarak azalttığı görülmüştür.

Anahtar Kelimeler : β-glukan, Pichiakudriavzevii, Paraprobiyotik, Biyomalzeme