Prostat kanseri hücrelerinde nobiletin flavanoidinin TLR4 ve TLR9 reseptörleri üzerine etkilerinin incelenmesi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, -, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2018
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ASUMAN DEVECİ ÖZKAN
Danışman: HACER İLKE ÖNEN
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Toll-benzeri reseptörler (TLR) epitelyal, immün ve kanser hücrelerinde ifade edilen ve iyi bilinen bir patern tanıma reseptörü ailesidir. Nobiletin (NOB), kanser karşıtı özelliklere sahip ve prostat kanseri riskini azalttığı bildirilen bir O-metillenmiş flavonoiddir. Bu çalışmada NOB'un etkileri TLR4 ve TLR9 üzerinde PC-3, LNCaP ve HUVEC hücrelerinde araştırılmıştır. Lipopolisakkarit (LPS) ve CpG-oligodeoksinükleotid (CpG-ODN) sırasıyla TLR4 ve TLR9 uyarımı için kullanılmıştır. Hücre canlılığı WST-1 ile analiz edilmiştir. NOB'un inhibe edici konsantrasyonu (IC50) LNCaP için 20 µM, PC-3 ve HUVEC için 40 µM olarak bulunmuştur (p<0,05). TLR4 ve TLR9 genlerinin ifade düzeyi Kantitatif Polimeraz Zincir Reaksiyonu (qPCR) ile analiz edilmiştir. NOB'un TLR4 ve TLR9 genlerinin ifade edilmesini azalttığı PC-3 hücrelerinde gözlenmiştir (p<0,05). Sitokinler (IFN-α ve IFN-β) enzim bağlı immünosorbent deneyi (ELISA) ile analiz edilmiştir. NOB'un IFN-α ve IFN-β miktarını LNCaP hücrelerinde azalttığı bunmuştur (p<0,05). TLR4 ve TLR9 sinyal yolaklarını NOB'un özellikle LNCaP hücrelerinde baskıladığı gözlenmiştir (p<0,05). Jelatinaz aktivitesi ve protein miktarı sırasıyla zimografi ve western blot ile analiz edilmiştir. MMP-2 ve MMP-9 jelatinaz aktivitesi PC-3 ve LNCaP için düşük bulunmuştur. MMP-2 aktivitesi HUVEC için yüksek bulunmasına rağmen, MMP-9 aktivitesi gözlenmemiştir (p<0,05). Aynı zamanda NOB'un LNCaP hücrelerine TLR4 ve IRF3 protein miktarını azalttığı bulunmuştur (p<0,05). Tüm sonuçlar birlikte değerlendirildiğinde, NOB'un anti-tümöral ve anti-metastatik etkisinin varlığı hem TLR4 hem TLR9 sinyal iletim yolu için gösterilmiştir. Araştırmamız NOB'un insanlarda prostat kanserinde immunoteropatik tedavi için iyi bir aday olduğunu ve prostat kanseri hücre canlılığını ve metastazını baskılamada etkili bir aday molekül olabileceğini göstermiştir.