Çiğ süt ve peynir örneklerinden izole edilen Listeria türlerinde biyofilm oluşumunun incelenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2013

Öğrenci: HAVVA YILDIRIM

Danışman: NİHAL YÜCEL

Özet:

Bu çalışmada, Ankara'da tüketime sunulan 80 çiğ süt ve 80 peynir örneğinde Listeria türlerinin varlığı araştırılmıştır. Bu amaçla steril koşullar altında alınan örnekler kısa sürede laboratuvara getirilmiş ve aynı gün işleme alınmıştır. Örneklerden Listeria türlerinin izolasyonu ISO 11290-1/A1-2004'de önerilen yönteme göre yapılmıştır. Araştırmada incelenen 80 çiğ süt ve 80 peynir örneğinden 15 izolat elde edilmiştir. Bu izolatların 11'i Listeria innocua, 3'ü Listeria grayi ve 1'i Listeria welshimeri olarak tanımlanmıştır. Biyofilm çalışma yöntemi olarak sıklıkla kullanılan stardart mikroplate (96 kuyucuklu plastik mikroplate) metodu ile çalışılmıştır. Bu yöntemle yapılan çalışmada Listeria spp. inoküle edilmiş triptic soy broth (TSB), TSB+%1 NaCl ve TSB+%1 glikoz besiyerleri 30°C'de 24, 48 ve 72 saat inkübasyona bırakılmıştır. Çiğ süt ve peynir örneklerinden izole edilen 15 Listeria izolatının TSB'de 24 saatlik inkübasyon sonrasında 9'unun, 48 saat sonra 5'inin, 72 saat sonra ise 1'nin iyi olarak tutunduğu tespit edilmiştir. Aynı izolatlar 30°C'de TSB+%1 NaCl'de 24 saat sonra 5 izolatın, 48 saat sonra 4 izolatın ve 72 saat sonra ise 2 izolatın iyi tutunduğu bulunmuştur. TSB+%1 glikoz'lu ortamda ise 30°C'de 24 v saat sonra 3 izolatın, 48 saat sonra 6 izolatın ve 72 saat sonra ise 1 izolatın iyi tutunduğu tespit edilmiştir. 30°C'de TSB'de inkübasyon sonrası çiğ süt örneklerinden izole edilen 5 no'lu L. innocua'da 24 saat sonra tutunma 1,016 bulunurken; peynir örneklerinden izole edilen 15 no'lu L. grayi'de ise 1,101 ile en yüksek tutunma tespit edilmiştir. 30°C'de TSB+%1 NaCl'de inkübasyon sonrası çiğ süt örneklerinden izole edilen 7 no'lu L. innocua'da 24 saat sonra tutunma 0,459 bulunurken; peynir örneklerinden izole edilen 15 no'lu L. grayi'de ise 0,617 ile en yüksek tutunma tespit edilmiştir. 30°C'de TSB+%1 glikoz'da inkübasyon sonrası çiğ süt örneklerinden izole edilen 7 no'lu L. innocua'da 24 saat sonra tutunma 0,253 bulunurken; peynir örneklerinden izole edilen 11 no'lu L. grayi'de ise 0,420 ile en yüksek tutunma tespit edilmiştir. Çiğ süt ve peynir örneklerinden izole edilen 15 Listeria izolatının 48 saatlik inkübasyon sonrasında kuvvetli derecede biyofilm oluşturduğu gözlenmiştir. 48 saatlik inkübasyon sonrası tutunmada TSB+%1 glikoz en iyi besi ortamı olarak tespit edilmiştir. Bunun nedeninin biyofilm oluşumunda bakteri hücreleri tarafından polisakkarit bazlı ekzopolisakkarit matriks üretiminin olduğu düşünülmüştür.