Akademik Veri Yönetim Sistemi
10. Ulusal Analitik Kimya Kongresi, Muğla, Türkiye, 7 - 11 Eylül 2022, ss.134
Giriş ve Amaç: İnsan karyonik gonadotropini (hCG) plesentanın trofoblastları tarafından yüksek konsantrasyonlarda üretilen bir glikoproteindir. Biyolojik sıvılarda hCG tayini doping kontrolü, erken hamilelik teşhisi ve kanser hastalığının tanısı gibi birçok amaçla kullanılabilir. hCG’nin erkek sporcularda performans arttırıcı etkisi varken kadın sporcularda böyle bir etki gözlenmemiştir. Bu nedenle hCG Dünya Dopingle Mücadele Ajansı’nın (WADA) yasaklılar listesindedir. WADA, hCG testinin akredite bir laboratuvarda yapılmasını önermektedir ve idrarda hCG konsantrasyonunun > 5 IU/L olması halinde testin sonucunu pozitif kabul etmektedir [1–3]. Doping analizlerinde duyarlılığı ve doğruluğu arttırmak için Kütle spektrometri (MS) temelli yöntemler kullanılmaktadır. hCG tayininde kullanılan diğer yöntemler elektrokimyasal immünolojik testler, kemilüminesans immünolojik testler (CLIA), floresans immünolojik testler (FIA), atomik emisyon spektrometrisi (AES) ve enzim immünolojik test yöntemleridir [4]. Ancak bu yöntemler uzun hazırlık ve ölçüm süresi gerektiren karmaşık tekniklerdir. Aynı zamanda analiz için yetişmiş personele ve analiz için pahalı cihazlara ihtiyaç duyulmaktadır. Bu çalışmada, hCG polidopamin kaplı manyetik nanopartiküller kullanılarak yapay idrar örneklerinden izole edilmiş ve kişisel şeker ölçüm cihazı kullanılarak kantitatif tayini yapılmıştır.
Yöntem: Polidopamin kaplı manyetik nanopartiküller hCG’yi numuneden izole etmek amacıyla, invertaz enzimiyle modifiye edilmiş altın nanopartiküller (AuNP) ise etiket olarak kullanılmıştır. Bu amaçla, polidopamin kaplı manyetik nanopartiküller ve invertaz enzimi ile modifiye edilmiş AuNp’lere anti-hCG bağlanmıştır. Numune ortamından hCG yakalanmış ve etiketlenerek sandviç yapı oluşturulmuştur. Daha sonra bu sandviç yapı asetat tamponu içinde hazırlanmış sükroz çözeltisine alınmıştır. Burada invertaz enziminin sükrozu glukoza çevirmesinden yararlanılmıştır. Oluşan glukoz miktarı şeker ölçüm cihazı kullanılarak ölçülmüş ve dolaylı hCG tayini yapılmıştır.
Sonuç ve Tartışma: Farklı hCG konsantrasyonlarına karşılık kişisel şeker ölçüm cihazındaki değişimler gözlenerek kalibrasyon grafiği oluşturulmuştur ve gerçek örneklere uygulanabilirliği gösterilmiştir.
Anahtar Kelimeler: Polidapamin kaplı manyetik nanopartikül, kişisel şeker ölçüm cihazı, doping kontrolü, invertaz, hCG.