Sakkaroz tayini için biyosensör hazırlanması

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2014

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Özlem Çolak

Danışman: AHMET YAŞAR

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada sakkaroz tayini için iki ve üç enzimli amperometrik biyosensörler geliştirildi. Platin elektroda (Pt) elektrokimyasal yöntemle kaplanmış polipirol-poli(vinil sülfonat) kompozit film (PPy-PVS) yüzeyine; glukoz oksidaz (GOD) ve invertaz (INV) enzimlerinin immobilizasyonu ile iki enzimli sakkaroz biyosensörü (Pt/PPy-PVS/GOD-INV), glukoz oksidaz, invertaz ve mutarotaz (MUT) enzimlerinin immobilizasyonu ile üç enzimli sakkaroz biyosensörü (Pt/PPy-PVS/GOD-INV-MUT) elde edildi. Glukoz oksidaz, invertaz ve mutarotaz enzimleri Pt/PPy-PVS elektrot yüzeyine glutaraldehit/BSA kullanılarak çapraz bağlama yöntemi ile immobilize edildi. Ayrıca glukoz girişimini engellemek amacı ile platin/polipirol-poli(vinil sülfonat) elektrot yüzeyine glukoz oksidaz enzimi immobilize edilerek glukoz biyosensörü hazırlandı. Sakkaroz ve glukoz tayini enzimatik tepkimeler sonucu açığa çıkan hidrojen peroksitin yükseltgenme akımının 0,40 V'da ölçülmesine dayanmaktadır. Hazırlanan biyosensörlerin performansını etkileyen özellikler ve optimum koşullar araştırıldı. Bu amaçla, substrat derişimi, pH, sıcaklık ve girişim yapan türlerin amperometrik cevaba etkileri incelendi ve tekrarlanabilirlik ve raf ömrü çalışmaları yapıldı. İmmobilize glukoz oksidaz, glukoz oksidaz-invertaz ve glukoz oksidaz-invertaz ve mutarotaz enzim sistemlerine ait Km(gör.) değerleri sırası ile 0,44 mM, 1,83 mM ve 0,75 mM olarak bulundu. Sakkaroz ve glukoz biyosensörlerinin gözlenebilme sınırı (LOD) ve doğrusal çalışma aralıkları belirlendi. Glukoz ve sakkaroz biyosensörleri ve referans yöntem ile meyve sularında sakkaroz tayini yapıldı ve sonuçlar karşılaştırıldı. Pt/PPy-PVS, Pt/PPy-PVS/GOD ve Pt/PPy-PVS/GOD-INV ve Pt/PPy-PVS/GOD-INV-MUT yüzeylerin; profilometri, atomik kuvvet mikroskopisi (AFM), taramalı elektron mikroskopu (SEM) ve temas açısı ölçüm yöntemleri kullanılarak fiziksel ve mikroskopik olarak karakterizasyonları gerçekleştirildi.