Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2022
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Sümeyye RAMAZANOĞLU
Danışman: Sevgi Akaydın
Özet:
Kanser dünya genelinde, ikinci ölüm nedenidir. Meme kanserinde GGT enzim aktivitesinin arttığı gösterilmiştir. GGT ailesinde GGT1'e nükleotit veya amino asit dizisi benzerliği olan olası aktif genlerin GGT5 ve GGT7 olduğu belirlenmiştir. Bu çalışmanın amacı siRNA uygulanan MCF 10A ve MDA-MB-231 hücre hatlarında gen susturmasının takiben GGT1, GGT5 ve GGT7’nin mRNA ve protein ekspresyon seviyelerinin sırasıyla qRT-PCR ve RAMAN spektroskopisi ile ölçülmesi; elde edilen sonuçları GGT aktivitesi, GSH ve LTD4 seviyeleri arasındaki ilişkileri araştırmaktadır. Her iki hücre hatlarında kontrole kıyasla si-GGT1 ile transfekte edilen hücrelerde tripan mavisi testi ile canlılık oranı anlamlı bir azalma saptanırken, MTT testi kullanıldığında anlamlı bir fark elde edilmemiştir. mRNA sonuçları ile benzer bir şekilde siRNA ile transfekte edilen hücrelerde protein miktarları transfekte edilmemiş hücrelere göre belirgin bir şekilde azalmıştır. Her iki hücre hatlarında da si-GGT1 ve si-GGT5 ile transfeksiyonu takiben GGT aktivitesinde azalma olmadığı ve GSH seviyesinin değişmediği gösterilmiştir. si-GGT7 ile transfekte edilen hücre hatlarında ise GGT aktivitesinin artığı belirlenmiş, MCF 10A hücre hattında GSH seviyesinin arttığı; MDA-MB 231 hücre hattında GSH seviyesinin azaldığı saptanmıştır. si-GGT5 ile transfekte edilen MDA MB-231 hücre hattında LTD4 seviyesinin azaldığı görülmüştür, fakat MCF 10A normal hücrelerdeki LTD4 seviyesi MDA-MB-231 kanserli hürelerindeki ile kıyaslandığında daha düşük olup susturma etkisi görülmemiştir. Parametreler arasındaki ilişki incelendiğinde, MCF 10A hücre hattında GGT aktivitesi ile tripan mavisi ile elde edilen canlılık oranları ve GGT aktivitesi ile LTD4 seviyesi arasında pozitif yönde orta düzeyde istatistiksel olarak anlamlı korelasyon olduğu, MDA-MB-231 hücre hattında ise GSH seviyesi ve LTD4 seviyesi, negatif yönde orta düzeyde istatistiksel olarak anlamlı korelasyon olduğu, LTD4 seviyesi ve tripan mavisi ile elde edilen canlılık oranları, pozitif yönde orta düzeyde istatistiksel olarak anlamlı korelasyon olduğu bulunmuştur. Sonuç olarak, GGT5 ve GGT-7 hücre metabolizmasında önemli rol aldıklarını düşünülmektedir.
Anahtar Kelimeler : GGT1, GGT5, GGT7, Gen susturulması, GGT aktivitesi, LTD4, GSH