İshalli hastalardan soyutlanan rotavirüslerin genotiplerinin incelenmesi ve G9 genotip varlığının araştırılması


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2019

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: KATREN ALBAKKOUR

Danışman: Ayşe Kalkancı

Özet:

Rotavirus, çocuk çağında görülen gastroenteritlerinin sebeplerindendir. Gelişmekte olan

ülkelerde mortalite ve morbiditenin en yaygın nedenlerindendir. Bu çalışmanın amacı,

Ankara'da üçüncü basamak bir hastaneye başvuran, 0-65 yaş arasında, akut gastroenteritli,

rota virüs hızlı antijen testi pozitif hastaların dışkı örneklerinde rotavirüsün genotiplerinin

RT PZR yöntemi ile belirlenmesidir. Bu çalışma Gazi Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi

Mikrobiyoloji Anabilim Dalı’na Ocak 2013 ile Nisan 2018 tarihleri arasında gastroenterit

şikayeti ile başvuran ve dışkıları Mikrobiyoloji laboratuvarına yollanan ve

immünokromatografik yöntem ile pozitif bulunan, 0-65 yaş arasındaki 87 (40 kız, 47

erkek) hastanın dışkı örnekleri toplanarak gerçekleştirilmiştir. Rotavirus VP-7

amplifikasyonu Beg9 ve End9 primerleri kullanılarak, G genotiplendirme G1-G4 ve G9

için özgül primerler kullanılarak gerçekleştirilmiştir. VP-4 amplifikasyonu con-2 ve con-3

primerleri kullanılarak yapılmıştır. P genotipleri P[8], P[4], P[6] ve P[9] için özgül

primerler ile belirlenmiştir. VP4 ve VP7 gen amplifikasyonu için AccessQuick RT-PZR

(Promega Corporation, Madison, WI), genotiplendirme için de PZR Mastermix (Promega,

Madison, WI) kullanılmıştır. Rotavirus antijen pozitifliği saptanan olguların cinsiyetler

arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır. Rotavirus enfeksiyonu en sık

12-23 aylık çocuklarda saptanmıştır. Antijen pozitifliğinin en sık kış ve sonbahar

mevsiminde yoğunlaştığı izlenmiştir. Tiplendirme sonucunda G1 (% 25,80), G2 (% 3,22),

G3 (% 4,30), G4 (% 6,45), G9 (% 60,21) G tipi olarak belirlenmiştir. P4 (% 1,14), P8 (%

93,10), P6 (% 5,74) P tipi olarak belirlenmiştir. Hem G hem de P tipleri birlikte tespit

edilmiştir. En sık görülen tipi G9P[8] (% 56,98) ve G1P[8] (% 22,58) olduğu saptanmıştır.

Tüm dünyada olduğu gibi bizim çalışmamız’daki Rotavirüs enfeksiyonu olan olgularda da

G9 ve P[8]’in en sık genotipler olduğu görülmüştür. Benzer çalışmalar en sık G9P[8] tespit

edilmiştir. Ancak yıldan yıla G9 genotipinin Ankara ’da arttığı görülmüştür.

Anahtar Kelimeler : Rotavirus, VP4, VP7, VP6, NSP4, RT-PCR.