Asetilkolinesterazın doğal polimerler kullanılarak immobilizasyonu


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, KİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2005

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: FERAT ŞAHİN

Danışman: HAYRETTİN TÜMTÜRK

Özet:

m ASETİLKOLİNESTERAZIN DOĞAL POLİMERLER KULLANILARAK İMMOBİLİZASYONU (Yüksek Lisans Tezi) Ferat ŞAHİN GAZİ ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ Mayıs 2005 ÖZET Sunulan bu çalışmada, asetilkolinesteraz enzimi (E.C. 3.1.1.7) al j inat ve kappa- karragenan kullanılarak hapsetme ve kovalent bağlanma ile immobilize edilmiştir. Serbest ve immobilize enzimler için maksimum reaksiyon hızı (Vmak) ve Michaelis-Menten sabiti (Km) araştırılmıştır. Serbest enzim için Km ve Vmak değerleri sırasıyla 6,35xl0-3 M ve 5,00x10-4 M.dak_1 ve hapsetme ile immobilize enzimler için ise Km değerleri 8,68xl0"3 M - 12,7xl0"3 M ve Vmak değerleri 3,97x1ü"4 M.dak_1 - 5,29x1ü"4 M.dak"1 arasında bulunmuştur. Serbest ve immobilize enzim üzerine pH, sıcaklık, depolama kararlılığı ve termal kararlılık incelenmiştir. Serbest, Ca-aljinat ve Ca-aljinat/kappa-karragenan polimer karışımlarına hapsetme ile immobilize edilen enzim için, optimum pH 7 olarak bulunmuştur. Serbest ve immobilize enzim için optimum sıcaklık ise 30 °C olarak tespit edilmiştir. Bu çalışmalara ilaveten, asetilkolinesteraz Ca-aljinat küreleri üzerine ikili olarak immobilize edilmiştir. Jel kürelerinin yüzey modifikasyonu karbodiimit kullanılarak gerçekleştirilmiştir. İkili immobilize edilen enzim için, optimum pH ve sıcaklık sırası ile 8 ve 35°C olarak gözlenmiştir. İkili immobilize edilen enzim için Km ve Vmak değerleri sırasıyla 26,8xl0"3 M ve 5,09x1 0"4 M.dak"1 olarak bulunmuştur. Enzimin tekrar kullanım sayısı, depolama ve termal kararlılığı ikili immobilizasyon ile arttırılmıştır.IV Bilim Kodu : 405 Anahtar Kelimeler :İmmobilizasyon, asetilkolinesteraz, karragenan, aljinat. Sayfa Adedi : 66 Tez Yöneticisi : Yrd.Doç.Dr. Hayrettin TÜMTÜRK