Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2012
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Özlem Gökçe
Danışman: ABDULLAH EKMEKÇİ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Malignant melanoma (MM) bir deri tümörüdür ve hem görülme sıklığı hem de ölüm oranı açısından büyük bir sağlık problemi olarak değerlendirilmektedir. Siklin bağımlı kinazlar (CDK) hücre döngüsünün düzenlenmesinde çok etkili olduklarından kanser tedavisinde hedeftirler. P16INK4A hücre döngüsünün giriş çıkışında ve kontrol noktasının bütünlüğünde görevlidir. Bir CDK inhibitörü olan flavopiridol ,hücre döngüsünün durmasını uyaran P16INK4A yı taklit eden bir ajandır. Flavopiridol en güçlü etkisini oksaliplatin gibi DNA hasarı uyarıcılarıyla birlikte uygulandığında gösterir. Çalışmamızda P16INK4A olmayan hücre hattı B16F10 da flavopiridol ve oksaliplatin kombinasyonunun antiproliferatif etkilerini ve ayrıca B16F10 enjeksiyonuyla oluşturulmuş melanoma tümör modelinde tek ajan olarak flavopiridolün apoptotik etkilerini araştırdık. Oksaliplatin (40 μM and 80 μM), flavopiridol (50 nM, 100 nM, 200 nM, 400 nM) ve bunların kombinasyonlarının B16F10 hücrelerindeki antiproliferatif etkileri 24 ve 48 saatte MTT testiyle ölçüldü. Flavopiridol hücre canlılığını 24 saatte 100 nM da bile azaltmıştır. Diğer yandan flavopiridol ve oksaliplatin antagonistik etkiye sahiptir ve birlikte kullanıldıklarında hücre ölümünü azaltırlar. B16F10 hücreleri subkutanöz olarak C57BL6 farelere enjekte edilip, tümör oluşumu gözlendikten sonra bu fareler flavopiridol (2,5 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg) ve DMSO (kontrol grubu) ile tedavi edildi. Kaspaz 3/7 ve kaspaz 9 aktiviteleri kolorimetrik yöntemle analiz edildi. Flavopiridol in vitro ve in vivo kaspaz 3/7 ve kaspaz 9 aktivitelerini doza bağımlı olarak artırdı. Bcl-2 ve PCNA ifadeleri immünohistokimyasal olarak analiz edildi. Her ne kadar Bcl-2 boyaması flavopiridol ile tedavi edilen gruplarda artsa da, PCNA boyaması flavopiridol uygulanan farelerde azalmıştır. BRAF, kaspaz 3 ve Bcl2l1 mRNA ifade düzeyleri qPCR ile değerlendirildi. Sonuç olarak, flavopiridol tedavisi tek ajan olarak B16F10 hücrelerinin hücre canlılığında daha iyi bir etkiye sahiptir. Ayrıca mitokondriyal apoptotik yolak aracılığıyla doza bağımlı olarak kaspaz aktivitesini artırır. PCNA ifadesindeki azalış flavopridolün hücre döngüsünün durması ile sonuçlanabilen antiproliferatif etkisini gösterdi.