Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2014
Öğrenci: NURHAN ALBAYRAK
Danışman: EMİN ÜMİT BAĞRIAÇIK
Özet:Makrofajlar Mycobacterium tuberculosis enfeksiyonuna karşı korunmada ana bileşendir. M. tuberculosis mannoz-kaplı lipoarabinomannanı (Man-LAM) ile makrofaj reseptörlerinin etkileşimi, makrofaj işlevini düzenlemektedir. Bu çalışmada, granülom formasyonunda enfeksiyonu sınırlama işlevi olan fibroblastların Man-LAM ile uyarımı takiben makrofaj polarizasyonuna etkisinin kokültür modelinde araştırılması amaçlanmıştır. Man-LAM M. tuberculosis H37Rv standart suşundan izole edildi. 3T3 fare fibroblast ve J774.1 fare makrofaj hücre dizinleri kokültür çalışmalarında kullanıldı. 3T3 ve J774.1 hücreleri üç farklı şekilde Man-LAM ile uyarıldı; tek başlarına, temas halinde ve 0,4 µm por çaplı naylon membran filtre ile temassız olarak. Ayrıca hücreler tüm bu üç konfigürasyonda TLR-2 antagonistleri ile bloklandı. İnkübasyonun 18'inci saatinde süpernatant sitokin analizi için toplandı. Yirmidördüncü saatte toplanan hücrelerden akım sitometri ile CD11b, CD80, CD86, MHC sınıf II, CD103, CD44, CD62L, CD107b yüzey molekül ekspresyonlarınının analizi yapıldı. Man-LAM ile uyarılan makrofajların, fibroblast varlığında M1 makrofaj fenotipi ile ilişkili İL-12 ve TNF-α sitokinlerini oluşturduğu gözlendi. Bu etkinin tümüyle hücre hücre temasına bağlı olmadığı saptandı. Ayrıca Man-LAM ile uyarımın M2 makrofaj fenotipi ile ilişkili TGF-β ve İL-10 üretiminde azalmaya neden olduğu saptandı. Ek olarak, immün düzenleyici sitokin İL-33 üretiminin fibroblast ve makrofaj kokültür modellerinde arttığı tespit edildi. Akım sitometri analizi için makrofaj hücreleri ilk önce CD11b ile karakterize edildi. Man-LAM ile uyarımı takiben CD11b+ makrofaj hücrelerinin MHC sınıf II ve CD86 ekspresyonlarının fibroblast varlığında devam ettiği gösterildi. Bulgular, fibroblastların Man-LAM ile uyarılması sonucu makrofajların M1 fenotipine farklılaştığını ve fibroblastın makrofajı aktive ederek yanıt verdiğini gösterdi. Ayrıca bu etkinin TLR-2'nin bloklanmasından sonra arttığı saptandı. Fibroblastların granülom formasyonunda makrofajların polarizasyonunu ve aktivasyonunu etkileyerek immünolojik olarak aktif rol aldığı, TLR-2'nin Man-LAM ile uyarımı takiben immün modülatör etkiye sahip olduğu kanısına varılmıştır.