Üreaz enziminin polianiline immobilizasyonu ile üreye duyarlı enzim mikroelektrodunun hazırlanması
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, KİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2001
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: BERNE GÜLAY BOZ
Danışman: ERDOĞAN HASDEMİR
Özet:ÜREAZ ENZİMİNİN POLİANİLIN'E İMMOBİLİZ \SYONU İLE ÜREYE DUYARLI ENZİM MİKROELEKTRODUNUN HAZIRLANMASI (Yüksek Lisans Tezi) Berna GÜLAY BOZ GAZİ ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ Şubat 2001 ÖZET Yapılan araştırmada; insan kanı ve idrarındaki üre\e duyarlı bir enzim elektrodu yapımı amaçlandı. Bunun için üreaz enzmi immobilizasyon yöntemi ile polimer içinde kararlı ve dayanıklı hale getirildi. Üreaz enziminin immobilizasyonu için sentetik-iletken karakterli polimerik bir destek maddesi olan polianilinden yararlanıldı. Polianilin; 10 mL, 0,1 M KCI; 10 mL, 0,04 M Anilin(H2SCVde) monomerli çözelti ortamında; özel yapılmış çalışma hücresinde elektropolimerizasyonlu Pt mikroelektroda +0,90 V'da, oda sıcaklığında 8 saatte sentezlondi. Pt-PAn-Üreaz mikroelektrodunu elde etmek için üreaz enzimi Pl-PAn halinde olan mikroelektroda fiziksel bir yöntem olan adsorpsiyon ile 2 saatte, 35°C termostatlı-çalkalamalı su banyosunda immobilize edildi. Pt-PAn-Üreaz haline gelen mikroelektrot 8,3x1 O-3 M üre titrasyonu ile potansiyel ölçümü yapılarak, substrata duyarlılığı araştırıldı. Serbest enzimi etkileyen parametreler; Nessler reaktifi ile 440 nm'de UV-GB spektrofotometrik olarak absorbans takibi ile inkübasyon süresi 30 dakika ; pH=7; substrat 8,3x1 0"3 M üredir. Aynı işlemler immobilize enzim içinde yapıldı. Sonuçlar aynı çıkınca, immobilizasyonun fiziksel adsorpsiyon olduğu sonucuna varıldı. Serbest enzimin raf ömrü 30 gün bulunurken; immobilize enzimin raf ömrü 20 gün bulundu. Pt-PAn mikroelektrodun maksimum 12 kere immobilizasyon yapılabildiği görüldü. Standart üre çözeltileri ile yapılan çalışmalarda hazırlanan enzim mikroelektrodunda slandart sapmanın az olduğu görüldü, fakat kan serumu ile yapılan denemelerde mikroelektrodun uyum sağlamadığı görüldü, bunun sebebi de mikroelektrodun kan serumunda ürenin dışında girişim yapabilecek organik ve inorganik maddelerin olması şeklinde değerlendirildi. Bilim Kodu : 405.05.00 Anahtar Kelimeler : İmmobilizasyon, Enzim Elektrodu, Üreaz Sayfa Adedi : 120