Yüzeyde Başlatılan Halka Açılması Metatez Polimerizasyonu Ve Tiyol-İn Klik Tepkimesi Kombinasyonu İle Hibrit Polimer Fırça Sentezi Ve Dna Hibridizasyonunda Kullanımı


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2021

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Esra ALTAY ÖZTÜRK

Danışman: TUNCER ÇAYKARA

Özet:

Hidroksil sonlandırılmıĢ silisyum (Si-OH) yüzeyinde iyi tanımlanmıĢ hiyalüronik asit aĢılı poli(ekzo-7-oksabisiklo [2.2.1] hept-5-en-2,3-dikarboksilik anhidrit) [poli(EHDA)-HA] fırçaları yüzeyde baĢlatılan halka açılma metatez polimerizasyonu (ROMP) ve tiyol-in klik tepkimesi kombinasyonu ile hazırlandı. Bu iĢlem birbirini takip eden dört aĢamada gerçekleĢtirildi: (i) Si-OH yüzeyine (3-aminopropil) trietoksisilanın kendinden oluĢan tek tabaka yöntemi ile bağlanması (Si-APTES), (ii) EHDA monomerinin Si-APTES yüzeyine bağlanması, (iii) yüzeyde baĢlatılan ROMP ile poli(EHDA) fırçaların sentezi ve (iv) tiyolize hiyalüronik asitin (Th-HA) tiyol-in klik tepkimesi ile poli(EHDA) zincirlerine bağlanması. Poli(EHDA)-HA fırçaların yüzey ıslanabilirliği, yüzey morfolojisi ve kimyasal bileĢimleri sırasıyla temas açısı ölçümleri, atomik kuvvet mikroskopi ve X-ıĢını fotoelektron spektroskopisi ile karakterize edildi. Poli(EHDA) fırçaların aĢılama yoğunluğu (ζ, zincir nm-2) ve aĢılama noktaları arasındaki ortalama uzaklık (D, nm), [katalizör]/[monomer] oranından bağımsız olarak sırasıyla 0,50 zincir nm-2 ve 1,65 nm olarak belirlendi. Bu durum silisyum substrat yüzeyinde yüksek aĢılamanın oluĢtuğunu gösterdi. Bununla birlikte, yüksek hacimli Th-HA moleküllerinin sterik engeller oluĢturması sebebiyle düĢük mol kütleli HA molekülleri poli(EHDA) zincirlerine bağlandı. Fırçaların biyouyumlu özelliği, (3-(4,5-dimetiltiyazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolyum bromür) (MTT) sitotoksisite testi ile belirlendi. Poli(EHDA)-HA fırçalara önce tek iplikli RNA molekülleri bağlandı daha sonra eĢlenik DNA probu ile hibridizasyonu yapıldı ve yüzey Floresans Spektrumu ve Lazer Taramalı Konfokal Mikroskobu ile incelendi. Sonuç olarak, poli(EHDA)-HA fırçalarının biyo-uyumlu özelliği, biyomoleküllerin yüzeylerdeki davranıĢını kontrol etmek için geliĢmiĢ biyolojik cihazlar yapmak için yararlı bir aday olabilir.