Yerli Ve Milli Tetanoz Ve Difteri Toksoid Aşılarıyla Oluşan İmmün Cevapların, İn Vitro Ve Ex Vivo Karakterizasyonu
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, İmmünoloji Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2021
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Nihan Örüklü
Danışman: E. Ümit Bağrıaçık
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:
Bu tez çalışmasında Gazi Üniversitesi Tıp Fakültesi İmmünoloji Anabilim Dalı’nda
geliştirimiş olan tetanoz ve difteri toksoid aşılarının oluşturduğu immün cevapların
in vitro ve ex vivo yöntemler kullanılarak karakterize edilmesi amaçlandı. Bu aşılar
alüminyum hidroksit ve kalsiyum fosfat olmak üzere iki farklı adjuvan içermektedir.
Aşılar subkütan (SK) ve intraperitoneal (İP) olarak iki farklı yolla uygulandı.
Geliştirilen aşılar ve mevcut olarak kullanılan erişkin tip tetanoz difteri aşısı ile elde
edilen immün cevaplar karşılaştırılmalı olarak çalışıldı. Aşılama sonrası fare dalak
mononükleer hücreleri akım sitometri ile analiz edilerek, CD4+, CD8+ ve CD19+
hücre miktarları saptanarak karşılaştırıldı. İP yolla uygulanan aşı gruplarındaki
farelerin kontrol grubuna göre daha yüksek CD4+ T hücre ve CD19+ B hücre
sayısına sahip olduğu bulundu. Hem SK hem de İP yolla uygulanan aşılarda,
farelerde oluşan İgG tipindeki anti tetanoz toksoid ve anti difteri toksoid antikorlarının
varlığı ve konsantrasyonları ELISA metodu ile gösterildi. Alum adjuvanı içeren
aşılarla oluşan antikorların koruyuculuğu ve nötralizan özellikleri, tetanoz toksini
“challenge” ve difteri toksini in vitro nötralizasyon testleri ile gösterildi. Hem ticari
aşıda hem de geliştirilen aşıda tetanoz toksoidi için koruyuculuğun > %99,9 olduğu
gösterildi. Anti difteri antikorların nötralizasyon kapasiteleri değerlendirildiğinde ticari
aşı ve geliştirilen aşı arasında herhangi bir fark olmadığı bulundu. Aşı antijeni olarak
kullanılan toksinlerin total protein miktarları ve Lf değerleri belirlendi. SDS-PAGE Jel
elektroforezi ile saflıkları gösterilerek Western Blot ile antijenlerin sağlaması yapıldı.
Farelerde tetanoz toksini LD50 ve PD50 dozları ve difteri toksini VERO-E6
hücrelerinde MSD MTT yöntemi ile saptandı.
Anahtar Kelimeler : Tetanoz, difteri, toksoid aşı, yerli, milli, immün reaksiyon, karakterizasyon