İNSAN UMBİLİKAL VEN ENDOTEL HÜCRELERİNDE UVABAİN İLE İNDÜKLENEN APONEKROTİK ÖLÜMLERDE RHO KİNAZIN OLASI ROLÜNÜN İNCELENMESİ


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2008

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Aysun Özdemir

Danışman: MUSTAFA ARK

Özet:

Oubainin indüklediği hücre ölümleri ve apoptoziste Rho kinazın olası rölü insan umbilikal ven endotel hücrelerinde (HUVEC) arastırılmıstır. HUVEC doğumdan sonra alınan umbilikal kordlardan izole edilmis ve yalnızca primer hücreler deneylerde kullanılmıstır. Endotel hücreleri yapıstıkları yüzeyi tamamen kaplayınca, hücrelere uvabainin (0.1-10μM, 16 saat) farklı konsantrasyonları ile ROCK inhibitörü olan Y27632 (10μM) uygulanmıstır. Hücre morfolojisi ve yapıstıkları yüzeyden kalkmaları faz kontrast ve floresan mikroskobi ile, ROCK I ve kaspaz 3 ekspresyonları immünoblotlama ile ölçülmüstür. Uvabainin, hücre kopmasına ve membran tomurcuk olusumuna neden olduğu bulunmustur. Ayrıca 10μM uvabain uygulaması endotel hücrelerin tomurcuklu hücre sayısını anlamlı olarak artırmıstır. Y27632 ön uygulaması ise uvabainin indüklediği membran tomurcuk olusumunu anlamlı olarak inhibe etmistir. Uvabain yüzen ölü hücre sayısını da anlamlı olarak artırmıstır. Fakat Y27632 ön uygulaması yüzen hücre sayısında anlamlı bir değisikliğe neden olmamıstır. HUVEC’te uvabainin hücre kopmasına etkisi doz bağımlıdır. Bu etki Y27632 ön uygulaması ile geri çevrilmistir. ROCK I ve kaspaz 3’ün aktif fragmantasyonu da 10μM uvabain uygulanmıs hücrelerde anlamlı olarak artmıstır. Sonuçlarımız uvabainin indüklediği hücre kopması ve membran tomurcuk olusumunda Rho kinazın önemli bir rolü olduğunu göstermistir. Bu bulgular endojen uvabain düzeylerinin yükseldiği esansiyel hipertansiyon olgularında önemli olabilir. Ayrıca bulgularımız kanser hastalarında, uvabain ve ROCK inhibitörleri ile kombine tedavi olasılığını ima etmektedir.