Periodontal doku mühendisliği uygulamaları için geliştirilen üç fazlı prototip membranların rejeneratif kapasitelerinin in vitro olarak incelenmesi


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2015

Öğrenci: SÜHAN GÜRBÜZ

Danışman: ALTAN DOĞAN

Özet:

Son yıllarda gelişen periodontal doku mühendisliği yaklaşımı ile yönlendirilmiş doku rejenerasyonu prensipleri birleştirilerek yeni bir prototip membran tasarlandı ve üretildi. Bu çalışmanın hedefi polikaprolakton (PCL), nano hidroksiapatit (nHA), kollajen (COL) ve rhBMP-7 içeren ve hiyerarşik olarak görev görmesi planlanan çok katlı membranın MC3T3-E1 (fare osteojenik) hücrelerinde etkisini araştırmak, nHA nın kemik rejenerasyonuna katkısını ve rhBMP-7 yüklü membranın salım kinetiklerini ve hücre fonksiyonlarını değerlendirmektir. Membranların fiziksel özelliklerini incelemek amacıyla SEM, EDX, FTIR-ATR ve salım çalışmaları gerçekleştirildi. Çalışmalar sonucunda nHA ve kollajenin yapıya katıldığı ve çok katlı membranın SEM görüntülerinde çekirdek tabakasının por genişliğinin osteoblastlar için uygun büyüklükte olduğu (337 nm) bulundu. rhBMP-7 içeren membrandaki rhBMP-7 nin %42 sini ilk 4 saat içinde, kalanının ise 3 gün boyunca salım gösterdiği bulgulandı. Yapılan in vitro çalışmadan elde edilen SEM görüntülerinde ise, membranın dış tabakasına hücrelerin tutunduğu, yer yer içerisine girdiği ve ekstrasellüler matriksi oluşturduğu bulgulandı. Tüm membranlarda hücrelerin canlı olduğu ve en çok rhBMP-7 varlığında çoğalma olduğu MTT analizi ile gözlendi. Hücrelerin osteoblastik farklılaşmasını gösteren belirteçler ALP analizi ile, osteojenik gen sonuçları gerçek zamanlı RT-qPCR ile belirlendi. rhBMP-7 li grupta ALP aktivitesi ve COL-1, Runx2, OCN, OPN gen düzeyleri anlamlı olarak yüksek bulundu. Bu çalışma üç farklı içerikte hazırlanmış membranlardan rhBMP-7 ile yüklenmiş PCL, nHA, COL içeren üç fazlı prototip membranın periodontal doku rejenerasyonda etkin bir membran olabileceğini göstermiştir.