ISPANAKTAN ELDE EDİLEN GLUTATYON REDÜKTAZ ENZİMİNİN TAYİNİ İÇİN KARE DALGA KATODİK SIYIRMA VOLTAMETRİSİ İLE YÖNTEM GELİŞTİRİLMESİ


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2021

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: HANDE AKAR

Danışman: Mehmet Sayım Karacan

Özet:

Bu çalışmada, kare dalga katodik sıyırma voltametrisi yöntemi kullanılarak glutatyon redüktaz enziminin (GR) aktivitesinin hesaplanması için yeni bir elektrokimyasal yöntem geliştirilmiştir. Kare dalga katodik sıyırma voltametrisi yöntemi kullanılarak indirgenmiş glutatyon (GSH) pikine enzim derişimi, pH, biriktirme süresi ve biriktirme potansiyeli gibi farklı parametrelerin etkileri incelenmiştir. GR enzimini tayin edebilmek için kullanılan numune ıspanaktan izole edilmiştir. Ispanaktan izole edilen GR enziminin aktivitesi, kare dalga katodik sıyırma voltametrisi ile Unit/mL cinsinden hesaplanmıştır. Bu yöntemle elde edilen GR'nin enzimatik aktivitesi, UV-GB spektroskopisi kullanılarak elde edilen sonuçlarla karşılaştırılmıştır ve sonuçlar yeni yöntemin güvenilir olduğunu göstermiştir. GSH için gözlenebilme ve tayin sınır değerleri hesaplanmış olup CLOD= 4,14×10-7 M ve CLOQ= 13,8×10-7 M olarak bulunmuştur. Ayrıca GSH’a ait bazı elektrokimyasal davranışlar incelenmiştir. Bunun sonucunda sınır akımı 1,962×10-9 A, Cottrell eğimi 2,499×10-7 , difüzyon katsayısı 1,849×10-5 cm2 /s, indirgenme esnasında mol başına transfer edilen elektron sayısı 2, difüzyon kontrollü ve indirgenme mekanizmasının ‘ECE mekanizması’ olduğu belirlenmiştir. 

Anahtar Kelimeler : Kare dalga sıyırma voltametrisi, glutatyon redüktaz enzimi, enzim aktivitesi tayini