Kanser tedavisinde kullanılabilir olarak geliştirilmiş anti-vegf monoklonal antikorların moleküler ve immünolojik karakterizasyonunun in vitro yöntemler ile araştırılması


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2017

Öğrenci: MELEK YAMAN

Danışman: EMİN ÜMİT BAĞRIAÇIK

Özet:

Vasküler endotelyal büyüme faktörü-A (VEGF-A) anjiyogenez aktivatörlerinin içinde en önemli olan büyüme faktörüdür. Bu çalışmada VEGF-A'ya karşı yeni geliştirilmiş üç adet monoklonal antikorun moleküler ve immünolojik karakterizasyonu in vitro yöntemler kullanılarak araştırıldı. Antikorlar 5D6.5, 1B4.2 ve 3B2.1 olarak adlandırıldı. Çalışmaların ilk basamağında yeni geliştirilen anti-VEGF-A antikorları hibridoma kültür süpernatanlarından afinite kromotografisi yöntemi kullanılarak saflaştırıldı. Saflaştırılan antikorların ELİSA, akım sitometri, hücre içi boyama ve Western blot yöntemlerindeki kullanılabilirlikleri test edildi. Karakterizasyonu yapılan antikorlardan 5D6.5 adı verilen antikor ELİSA ve Western blot çalışmalarında VEGF-A proteinine bağlanabilirken, akım sitometri ve immünofloresan boyamada VEGF-A proteinine bağlanamamıştır. 3B2.1 antikoru ise ELİSA, hücre içi boyama ve akım sitometri yönteminde VEGF-A proteinine bağlanabilmiştir. 1B4.2 adı verilen antikor ELİSA, hücre içi boyama ve akım sitometri yönteminde VEGF-A proteinine bağlanabilmiştir. Elde edilen sonuçlara göre bu antikorların VEGF-A ile ilgili olarak araştırma amaçlı yapılan in-vitro çalışmalarda kullanılabileceği anlaşılmıştır.