Moleküler organik kavite modifiye nanopartikül tabanlı protein analiz sistemlerinin geliştirilmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Gazi Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, ANALİTİK KİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2019

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ELÇİN EZGİ AHİ

Danışman: Uğur Tamer

Özet:

Bu tez çalışmasında Yüzeyde Zenginleştirilmiş Raman Spektroskopi (YZRS) yönteminin

kullanıldığı, moleküler organik kavite modifiye manyetik nanopartikül tabanlı bir protein

analiz sistemi geliştirilmiştir. Tez çalışması kapsamında moleküler organik kavite modifiye

manyetik nanopartiküller ve Raman etiketinin bağlandığı altın nanoçubuklar sentezlenerek

karakterizasyon çalışmaları yapılmıştır. Moleküler organik kavite modifiye manyetik

nanopartiküller kullanılarak, erkek sporcularda doping amaçlı kullanılan ve Dünya Dopingle

Mücadele Ajansı tarafından yasaklanan insan koryonik gonadotropin (hCG) proteinin ön

zenginleştirmesi sağlanmıştır. hCG’nin bağlandığı manyetik nanopartiküller dört odacıktan

oluşan pasif bir çipin ilk odacığına aktarılmıştır. Daha sonra pasif çipin ikinci odacığında

5,5′-ditiyobis-(2-nitrobenzoik asit) (DTNB) Raman etiketi ve hCG’ye spesifik antikorun

bağlı olduğu altın nanoçubuklar ile etkileşmesi sağlanmıştır. Üçüncü odacıkta tampon

çözeltisi ile yıkama işlemi yapıldıktan sonra son odacıkta (okuma odacığında) MNP-hCGAuNP

konjugatına ait DTNB Raman etiketinin sinyalleri Raman spektrofotometresi

kullanılarak ölçülmüştür. Seçilik çalışması kapsamında İnsan Luteinizan Hormonu (hLH),

İnsan Koryonik Gonadotropin Hormonu (hGH) ve İmmünoglobulin G (IgG) ile çalışılmıştır.

Yöntemin regresyon katsayısı ve teşhis sınırı sırasıyla 0,9964 ve 1,34 IU/L olarak

bulunmuştur. Yöntemde gerçek örnek çalışması için 20 IU/L konsantrasyonundaki proteinin

ilave edildiği sentetik negatif idrar kontrol numunesi kullanılmıştır. Hedef proteinler için

geliştirilen analiz sistemi, klasik olarak rutin analizde kullanılan Western Blot gibi pahalı ve

çok uzun analiz süresi olan tekniklere alternatif olacaktır.

Anahtar Kelimeler : P rotein analizi, İnsan koryonik gonadotropin proteini, Moleküler

Organik Kavite, nanopartikül, Yüzeyde zenginleştirilmiş Raman

spektroskopisi